空氣中懸浮微生物的測(cè)定有多種，但其測(cè)定的基本過(guò)程都是經(jīng)過(guò)捕集-培養(yǎng)-計(jì)數(shù)的過(guò)程。目前普遍采用的是浮游菌和沉降菌的測(cè)試方法。浮游菌測(cè)試方法是通過(guò)收集懸浮在空氣中的生物粒子于專門(mén)的培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間在適宜的生長(zhǎng)條件下讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以此來(lái)判定潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中的活微生物數(shù)。沉降菌測(cè)試方法是通過(guò)自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見(jiàn)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來(lái)判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)。
1、檢測(cè)要求
（1）檢測(cè)前，被測(cè)潔凈室的運(yùn)行狀態(tài)必須在正常狀態(tài)，其溫度、濕度、風(fēng)量、風(fēng)壓及風(fēng)速必須在控制的規(guī)定值內(nèi)；被測(cè)試的潔凈室(區(qū))應(yīng)已進(jìn)行過(guò)消毒；同時(shí)，潔凈室的測(cè)試狀態(tài)必須符合生產(chǎn)工藝的要求，并在測(cè)試報(bào)告中注明其測(cè)試狀態(tài)。
（2）測(cè)試人員必須穿戴潔凈服，而且一般不得超過(guò)兩個(gè)人。
（3）凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間，對(duì)單向流如5級(jí)（100級(jí)）潔凈室或?qū)恿鞴ぷ髋_(tái)不得少于10min；對(duì)非單向流如7級(jí)（10000級(jí)）、 8級(jí)（100000級(jí)）的潔凈室不得少于30min。
（4）采樣點(diǎn)的布置及要求：
a.浮游菌測(cè)試時(shí)，采樣點(diǎn)位置可以與懸浮粒子測(cè)試點(diǎn)相同。工作區(qū)測(cè)點(diǎn)位置距地面0.8～1.5m（略高于工作面）；送風(fēng)口測(cè)點(diǎn)位置距送風(fēng)面30cm左右。根據(jù)需要可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。采樣點(diǎn)的布置應(yīng)力求均勻，避免局部區(qū)域過(guò)于集中或稀疏。
b.沉降菌測(cè)試時(shí)，采樣點(diǎn)的位置可以與懸浮粒子測(cè)試點(diǎn)相同。工作區(qū)采樣點(diǎn)的位置距地面0.8～1.5m（略高于工作面）；根據(jù)需要可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)，采樣點(diǎn)的布置應(yīng)力求均勻。
2、檢測(cè)方法
（1）浮游菌的檢測(cè)方法
1）首先應(yīng)對(duì)測(cè)試儀器、培養(yǎng)皿表面進(jìn)行嚴(yán)格消毒。采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于100級(jí)潔凈室的采樣器宜一直放在被測(cè)房間內(nèi)；用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面，把采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤(pán)以及罩子內(nèi)外消毒干凈；采樣口及采樣管在使用前必須高溫滅菌。
2）采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈室相應(yīng)的潔凈服，在轉(zhuǎn)盤(pán)上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手要用消毒劑消毒。
3）開(kāi)動(dòng)真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)， 時(shí)間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速。
4）關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋好蓋子后調(diào)節(jié)采樣器。
5）置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開(kāi)啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量選定采樣時(shí)間。
6）全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于30～35℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于45h。
7）用肉眼直接計(jì)數(shù)，然后用5～10倍放大鏡檢查，是否有遺漏。若平板上有兩個(gè)或兩個(gè)以上的菌落重疊，分辨時(shí)仍以兩個(gè)或兩個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。
（2）沉降菌檢測(cè)方法
1）首先也是對(duì)測(cè)試儀器、培養(yǎng)皿表面進(jìn)行嚴(yán)格消毒滅菌，在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h觀察，確信無(wú)菌后方可使用。
2）一般用Ø90mm的沉降平皿，注人20mL培養(yǎng)基，放在測(cè)點(diǎn)處，開(kāi)蓋暴露30min，將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。然后在30～35℃恒溫培養(yǎng)箱中經(jīng)48h培養(yǎng)為肉眼計(jì)菌落數(shù)，并記錄生成的菌落數(shù)CFU，然后用5～10 倍放大鏡檢查，是否有遺漏。若培養(yǎng)皿上有兩個(gè)或兩個(gè)以上的菌落重疊，分辨時(shí)仍以兩個(gè)或兩個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。
3、檢測(cè)儀器
（1）浮游菌測(cè)試儀器
1）儀器設(shè)備主要有采樣器、真空抽氣泵、培養(yǎng)皿、恒溫培養(yǎng)箱等。
2）微生物采樣器有多種形式，主要有固體撞擊式采樣器、離心式空氣微生物采樣器、氣旋式微生物氣溶膠采樣器、液體沖擊式微生物氣溶膠采樣器、過(guò)濾式微生物氣溶膠采樣器、大容量靜電沉降采樣器等。采樣器的選擇應(yīng)考慮采樣器的靈敏度、采樣效率，以及有利于微生物的存活、易于分析粒子大小、 易于操作和使用方便等因素。浮游菌采樣器一般采用狹縫式采樣器和離心式采樣器。
3）狹縫式采樣器(撞擊式采樣器)。各類狹縫式采樣器工作原理都相同。將采集的微生物氣溶膠噴射到緩慢旋轉(zhuǎn)的撞擊板或固體培養(yǎng)基表面上，具有足夠大運(yùn)量的粒子撞擊到收集板上，而較小粒子由于慣性小在氣流夾攜下流出。每種型號(hào)的撞擊式采樣器都有其自身的收集效率。例如國(guó)產(chǎn)的THK-201型采樣器，屬于固體慣性撞擊式，打開(kāi)電源后用真空抽氣，懸浮于空氣中的帶菌粒子被吸入采樣頭的篩孔篩，該采樣器的特點(diǎn)是采樣頭篩孔隙是可調(diào)的，當(dāng)空隙調(diào)小時(shí)，可用于采集較小粒子；若要采集大粒子時(shí)，可將空隙調(diào)大，從而增大了采樣器的應(yīng)用范圍。
4）離心式采樣器基于離心撞擊原理，當(dāng)采樣器通電后，借助于蝸殼內(nèi)的葉輪高速旋轉(zhuǎn)，能把至少40cm距離以內(nèi)被測(cè)的帶菌空氣吸入，在離心力的作用下，空氣中的活微生物粒子加速撞擊到的培養(yǎng)基條上，采樣后的培養(yǎng)基條從蝸殼中取出，經(jīng)過(guò)恒溫、定時(shí)培養(yǎng)，形成菌落，然后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。國(guó)內(nèi)研制生產(chǎn)的JWC-1型采樣器便是一種性能較好的離心式空氣微生物采樣器，采樣量為40L/min。
（2）沉降菌測(cè)試所用的儀器設(shè)備
主要有高壓消毒鍋、恒溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿。培養(yǎng)皿一般采用Ø90mm*15mm的硼硅酸玻璃培養(yǎng)皿，培養(yǎng)基采用普通肉瓊脂培養(yǎng)基或《中華人民共和國(guó)藥典》認(rèn)可的其他培養(yǎng)基。
4、合格標(biāo)準(zhǔn)
國(guó)內(nèi)外有關(guān)浮游菌測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)：
 
國(guó)內(nèi)外有關(guān)沉降菌測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)：